产品参数 

Ex/Em：505/520 nm  

CAS号：117464-70-7

分子式：混合物（C30H20O11, C35H28O15, C40H36O19） 

分子量：平均分子量 688.6 

储存条件

-20℃避光保存，有效期见外包装。 

产品介绍

       BCECF, AM是一种可以穿透细胞膜检测细胞内pH的荧 光染料。BCECF, AM没有荧光，进入细胞后可以被细胞内的 酯酶剪切形成BCECF，从而被滞留在细胞内。BCECF在适当 的pH值条件下可以被激发形成绿色荧光。最大激发波长和 发射波长因pH的不同而有所不同，最大激发波长在503 nm 左右，最大发射波长在520 nm左右，实际检测时推荐使用的 激发波长为488 nm，发射波长为535 nm。 

       BCECF, AM 不仅被广泛用于哺乳动物细胞的研究，也 用于动物组织、植物细胞、细菌和酵母等的体内 pH 水平检 测。此外，在细胞内有 pH 变化的细胞毒性、细胞凋亡、细 胞粘附、药物抵抗、细胞趋化等过程中 BCECF, AM 也被广 泛应用。

实验步骤（以人中性粒细胞为例）*  

1. 试剂 

5 mM的BCECF, AM/DMSO  

HEPES缓冲液（20 mM HEPES, 153 mM NaCl, 5 mM KCl, 5  mM glucose, pH 7.4） 

2. 操作 

         溶液状态的BCECF, AM ester按照比例稀释成工作浓度 即可，常用的工作浓度为1-10 μM。 

（1）用HEPES制备细胞悬液（~106 个/mL）。 

（2）将5 mM的BCECF, AM/DMSO溶液加入细胞悬液中(细 胞悬液的1/1000体积)，BCECF, AM终浓度为5 μM。 

（3）在37ºC培养30 min。 

（4）用HEPES缓冲液清洗细胞2-3次。

（5）使用荧光显微镜或带有图像分析系统的激光共聚显微 镜检测细胞的荧光强度。

*标记的条件因细胞种类而异，在每次实验前，请先确定最 佳条件。以上方法仅供参考。

注意事项 

1. BCECF, AM可能对人体有害，请注意适当防护。

2. BCECF, AM在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在 离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。 

3. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光 淬灭。 

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。