储存温度： 

       SUMO Protease(10 U/μl)长期储存于-80℃，可保存 2 年；或小量分装后保存于-20℃，可保存 6 个月，避免反复冻融。10×SUMO Buffer +/-Salt 置于-20°C 保存即可。 

产品介绍：

        SUMO Protease 也称 Ulp，是一种具有较高活性的半胱氨酸蛋白酶，它能识别 SUMO 蛋白的三级结构，而不是氨基酸序列， 因此可以高效而且特异性地将 SUMO 蛋白从重组融合蛋白上切割下来。切割的最佳温度为 30°C，该酶作用温度（4-30℃）和 PH 范围（pH7-9）都比较广泛。SUMO Protease 是自大肠杆菌表达经亲和纯化的重组蛋白酶。 SUMO Protease 带有多聚组氨酸标签， 便于融合蛋白切割后利用亲和层析去除该蛋白酶。

酶活性单位定义： 

       在 1× SUMO Buffer -Salt(50 mM Tris-HCl, pH 8.0, 0.2% NP-40, 1 mM DTT)中，30°C 反应 1 h，剪切>85％的 2 μg 对照底物所需 要的酶量定义为一个活性单位。

应用：

       融合蛋白标签剪切去除。 

操作方法：

       若蛋白为热不稳定性，请在 4°C 孵育较长时间或增加酶的用量。

        1. 在 EP 管中配置如下反应体系： 融合蛋白 20 μg  ；SUMO Protease(10 U/μl)  1-5 μl ； 10× SUMO Buffer +/-Salt  20 μl  ；ddH2O Up to 200 μl 

        2. 混匀上述体系后于 30℃孵育，在 1、2、4、6 小时分别吸出 30 μl 上述反应液，置于单独的 EP 管中。 

        3. 向上述 EP 管中加入 20 μl 2×SDS Loading Buffer, 置于-20°C。 

        4. 取 30 μl 样品进行 SDA-PAGE 分析。 

注意事项：

        1. 10× SUMO Buffer +Salt(500 mM Tris-HCl, pH 8.0, 2% Igepal (NP-40), 1.5 M NaCl, 10 mM DTT); 10× SUMO Buffer -Salt(500 mM Tris-HCl, pH 8.0, 2% Igepal (NP-40), 10 mM DTT)请根据实验选择合适的缓冲液。 

        2. 为达到最好的酶切效果，请保证重组蛋白为部分或完全纯化的蛋白。对于大部分融合蛋白，SUMO 蛋白酶所需 NaCl 的浓 度不同的蛋白情况会有所差别，可根据实际情况在 0～300 mM 之间调节 NaCl 的浓度以达到最佳的效果。