产品参数： 

外观：橙红色液体； 

Ex：564 nm(before photolysis)； 

Ex/Em：510/610 nm(following photolysis and reaction with DNA/RNA)；

分子式：C27H32Cl2N6；

分子量：511.5；

应用范围：细菌、酵母、真菌、病毒活死状态鉴定，活性微生物的精准定量与群落分析，土壤、水体、粪便等环境中活 性微生物群落结构，食品致病菌残留，益生菌活菌计数，生物膜活性微生物检测等；

储运条件：4 ℃避光保存；冰袋运输。

产品组分

产品介绍
       Propidium Monoazide Bromide（PMA，叠氮溴化丙锭）是可以精准区分活菌与死菌DNA的光敏性染料。PMA对双链DNA 具有高亲和性，自身荧光微弱，与核酸结合后荧光信号显著增强。其核心作用原理为PMA无法穿透完整细胞膜，仅能特异 性进入细胞膜受损的死细胞内与DNA结合，在蓝光照射下，PMA的光反应性叠氮基会转化为高活性氮烯自由基，与DNA结 合位点附近烃基形成稳定共价氮碳键，实现DNA的永久修饰，从而有效阻碍死细胞中DNA的PCR扩增。而未结合的PMA在 强光下会与水反应分解为无交联活性的羟胺，从而阻止PMA与细菌基因组DNA提取过程中暴露的活菌DNA发生交联反应， 避免发生漏检现象。本产品核心优势为PMA的水溶性佳、操作简便且无细胞毒性，经 10 min孵育即可特异性修饰死菌DNA， 与DNA形成不可逆共价结合，阻断PCR扩增能力及死菌DNA去除率均显著优于EMA，能高效区分活死细胞，且不干扰活菌 检测，兼容qPCR精准定量，广泛适用于细菌、酵母等多类微生物及粪便、土壤、食品等复杂样本检测。 传统分子生物学检测技术局限性在于区分死细菌和活细菌周期长，复杂样品背景差，容易高估了样品中存在的细胞数量。 PMA可以修饰死菌，精准保留活菌DNA的扩增活性，为活性微生物的定量与群落分析提供可靠依据。该技术不仅推动了微 生物生态学中活性菌群功能解析的研究深度，为环境物质循环、微生物互作等机制研究提供了精准工具，还在食品益生菌活 菌定量、临床致病菌快速检测等实际应用场景中实现了技术突破。

注意事项：

1、适用范围与前期验证：PMA能根据细胞膜的通透程度区分死菌和活菌。多数杀菌方式会破坏细胞膜，适用于PMA检测，但紫外线照射等可能不会立即导致细胞膜破裂，存在假阳性风险。因此在使用PMA检测前，须进行文献查阅和预实验， 确认其适用于所选细菌种类和杀菌方法。

2、光解操作要点：对细菌进行PMA处理后，需进行光解，使染料与死细胞DNA共价结合，一般采用蓝光。光照强度越高，光解效率越好。不过，非LED灯（如卤素灯）照射时易使样本升温，影响分析结果，建议照射时用冰块给样品降温。 

3、样本保存注意事项：样本可在光解后冷冻保存。若在PMA处理和光解前冷冻，可能损坏细胞膜，导致假阴性结果。若需检测前冷冻样本，应先做预实验。 

4、DNA提取与对照设置：PMA通过沉淀去除共价修饰的DNA。提取基因组DNA时，需用相同体积的洗脱液进行体积归一 化。阳性对照建议选用活细胞的基因组DNA。 

5、有效性验证方法：验证PMA在测试样本中的有效性，可对比相同处理样本添加与未添加PMA时的Ct(dCt)变化。  操作前准备：使用前将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。

6、储存与使用要求：试剂盒组分含荧光染料，使用和保存时需注意避光。 

7、本产品仅限于科研用途并且不得存放于普通住宅内。  为了您的安全和健康，请遵循您所在常规实验室安全规定。

常见疑问与解答： 

1、问：死菌与活菌dCt小于1，可能是什么情况导致？ 

     答：原因如下， a.两个样本的 Ct 值均偏低，暗示所采用的杀菌条件可能未能达到理想效果，导致细菌未能彻底凋亡。而在 95 ℃的高温 加热处理下，几乎可以确信，细菌的细胞膜将遭受严重破裂，从而达到彻底灭菌的目的。 b.这两个样本的 Ct 值均偏高（Ct 值超过 30），这或许表明您的细菌样本曾经经历过冷冻过程，导致活菌的细胞膜受到 损伤，从而影响了检测结果的准确性。

2、 问：PMA跑HPLC为什么会出现双峰？

      答：由于本产品的特殊合成工艺，往往会导致同分异构体的生成，这些异构体之间在极性上存在微妙差异，从而在液 相色谱分析中呈现出独特的双峰现象。尽管如此，经过我司严谨的科学验证，这两种同分异构体的 PMA 在生物活性上 表现出了惊人的一致性—它们均能高效抑制死菌，且在抑制效率上毫无二致，确保了产品的卓越性能与稳定性。 

3、问：为什么光照交联最好选择蓝灯？

     答：在蓝光的照射下，光解效率显著提升。PMA 分子中的光反应性叠氮基团，在蓝光（波长约为 464 nm）的精准激活 下，蜕变为一群高活性的氮烯自由基。这些如同勇士般的自由基，勇猛地搜寻并锁定 DNA 结合位点周边的烃基部分， 与之激烈碰撞，进而铸就出坚固稳定的共价氮碳键。这一过程，无疑是 PMA 与 DNA 实现深度交联的核心环节，它不 仅揭示了分子间的互动奥秘，也开启了光化学反应的新篇章。