透析的定义: 透析(dialysis)是利用小分子物质在溶液中可通过半透膜,而大分子物质不能通过半透膜的性质,从而将大分子和小分子物质(无机盐、短肽或蛋白质小分子)分离开的方法。透析袋是具有微孔的膜,微孔的大小决定了只有分子量小于特定值的小分子物质才能够透出,而分子量较大的物质则滞留在透析袋内。这个特定的分子量称为截留分子量(molecular weight cut-off,MWCO)。 透析的原理: 透析过程中,将生物大分子样品溶液置入透析袋内并浸入缓冲液中,小分子物质不断扩散透析到袋外,而样品溶液中的大分子物质被截留在袋内,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。通过不断更换缓冲液,即可将样品中要除掉的小分子稀释到足够低的浓度。保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋外的溶液称为“透析液”。 透析袋的优缺点 优点:样品回收率高;操作简单,无需繁琐准备工作;成本低廉,可一次性使用;分离条件温和;无需监控。 缺点:耗时较长(24-48小时);要求较为明显的样品和杂质之间的分子量差(1-2个数量级)。 百瑞极提供两种类型的透析袋,一种为即用型透析袋,使用方便,节省时间。一种为干型透析袋,使用前需特殊处理,价格优惠。 1即用型透析袋 根据膜的材质不同又可以分为RC膜和CE膜 一、膜技术参数: 标准级RC膜(再生纤维素膜)可用于几乎所有的常规实验室透析应用,重金属离子和硫化物含量为痕迹级别。此类膜透明、柔韧,具有对称的孔隙分布,是脱盐、换液、大分子纯化等应用的理想选择。标准级 RC 膜具有宽泛的化学耐受性,可用于低浓度的强酸/碱溶液、高浓度的弱酸/碱溶液、大多数的醇以及温和或经稀释的有机溶剂,包括 DMSO。长时间暴露于强有机溶剂可能会对 RC 膜造成损坏。标准级 RC 膜适用 pH 范围2-12,适用温度范围4-121℃。 生物技术CE膜(纤维素酯膜),重金属离子和硫化物含量为痕迹水平;生物技术CE膜只能承受中性环境、弱酸、弱碱或温和醇类物质,接触强极性有机溶剂会损害CE膜;生物技术CE膜只能适用pH值2-9以及温度4-37℃之间。建议样本液和缓冲液都不要使用有机溶剂,遇有机溶剂袋子容易萎缩,如果一定欲使用有机溶剂,建议先用几公分透析袋做预实验。 储存条件: 透析膜浸泡在储存液中,放置于4-37 °C 之间环境。建议密封放在冰箱冷藏室4℃保存。 透析袋使用方法: 1、先带好手套,把透析袋剪成适当长度(10cm 左右)的小段,长度可以根据需要,但必须有足够的容器来容纳。 2、用蒸馏水彻底清洗透析袋,两头用手微微捏住,检查是否有漏袋。透析袋保存液含有防腐剂,对活性物质有抑制作用,至少用蒸馏水(纯水、去离子水均可)反复冲洗三次,有时间最好用蒸馏水浸泡30分钟再使用。 3、不使用的透析膜放回储存液中,密封保存,接触透析膜过程中必须戴手套。 4、使用时,一端用透析袋夹子夹紧,灌满水后,用手指适当加压,检查不漏,另一头也同样反复一次,以免夹子不够紧。然后装入样品,通常要留三分之一至一半的空间,以防透析过程中,袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋胀破。装完样品后,用夹子夹紧袋口,即可进行透析。为了加快透析速度,除多次更换透析缓冲液外,还可使用磁力搅拌器。透析的容器要大一些,可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。根据样品浓度决定透析时间,也可以过夜透析,透析时间在24~48小时为宜。用线吊着透析袋,使透析袋处于悬浮状态,也可以加速透析速度。 透析袋的选择: 1、正确选择合适的截留分子量 截留分子量的选择是以预留在膜内的大分子的分子量和将要被除去的小分子污染物的分子量为基础。为达到合理有效的分离,需分离的两种物质分子量的比率至少为25。选择截留分子量值约为要保留的大分子分子量的一半,以获得至少90%的保留率。 2、正确选择扁平宽度 透析袋扁平宽度的选择取决于样品体积和透析容量。较小的透析管透析更快;较大的透析管因扩散距离较长透析较慢。为易于使用,建议使用总长(包括闭合夹和顶部空间)为大约10-15厘米的透析袋。 3、透析袋的化学兼容性 化学兼容性主要用作使用指导,不作为化学相容的保证。温度、浓度、长时间曝光等因素的改变可能影响产品的使用。建议您自设条件进行测试。 百瑞极提供以下即用型透析袋产品 BN22101 即用型透析袋 扁宽18 1KD RC膜 BN22102 即用型透析袋 扁宽38 1KD RC膜 BN22103 即用型透析袋 扁宽45 1KD RC膜 BN22104 即用型透析袋 扁宽18 2KD RC膜 BN22105 即用型透析袋 扁宽38 2KD RC膜 BN22106 即用型透析袋 扁宽45 2KD RC膜 BN22107 即用型透析袋 扁宽18 3.5KD RC膜 BN22108 即用型透析袋 扁宽45 3.5KD RC膜 BN22109 即用型透析袋 扁宽54 3.5KD RC膜 BN22111 即用型透析袋 扁宽12 8KD RC膜 BN22113 即用型透析袋 扁宽24 8KD RC膜 BN22114 即用型透析袋 扁宽32 8KD RC膜 BN22115 即用型透析袋 扁宽40 8KD RC膜 BN22116 即用型透析袋 扁宽50 8KD RC膜 BN22118 即用型透析袋 扁宽12 10KD RC膜 BN22119 即用型透析袋 扁宽18 10KD RC膜 BN22120 即用型透析袋 扁宽24 10KD RC膜 BN22121 即用型透析袋 扁宽32 10KD RC膜 BN22122 即用型透析袋 扁宽45 10KD RC膜 BN22124 即用型透析袋 扁宽12 15KD RC膜 BN22126 即用型透析袋 扁宽24 15KD RC膜 BN22127 即用型透析袋 扁宽32 15KD RC膜 BN22128 即用型透析袋 扁宽45 15KD RC膜 BN22130 即用型透析袋 扁宽12 25KD RC膜 BN22131 即用型透析袋 扁宽18 25KD RC膜 BN22133 即用型透析袋 扁宽28 25KD RC膜 BN22134 即用型透析袋 扁宽34 25KD RC膜 BN22135 即用型透析袋 扁宽10 50KD RC膜 BN22136 即用型透析袋 扁宽12 50KD RC膜 BN22137 即用型透析袋 扁宽28 50KD RC膜 BN22138 即用型透析袋 扁宽34 50KD RC膜 BN22139 即用型透析袋 扁平10 (100-500D) CE膜 BN22140 即用型透析袋 扁平16 (100-500D) CE膜 BN22141 即用型透析袋 扁平24 (100-500D) CE膜 BN22142 即用型透析袋 扁平31 (100-500D) CE膜 BN22143 即用型透析袋 扁平10(500-1000D) CE膜 BN22144 即用型透析袋 扁平16(500-1000D) CE膜 BN22145 即用型透析袋 扁平24(500-1000D) CE膜 BN22146 即用型透析袋 扁平31(500-1000D) CE膜 BN22147 即用型透析袋 扁平10 (3.5-5KD) CE膜 BN22148 即用型透析袋 扁平16 (3.5-5KD) CE膜 BN22149 即用型透析袋 扁平24 (3.5-5KD) CE膜 BN22150 即用型透析袋 扁平31 (3.5-5KD) CE膜 BN22151 即用型透析袋 扁平10 (8-10KD) CE膜 BN22152 即用型透析袋 扁平16 (8-10KD) CE膜 BN22153 即用型透析袋 扁平24 (8-10KD) CE膜 BN22154 即用型透析袋 扁平31 (8-10KD) CE膜 BN22155 即用型透析袋 扁平10 20KD CE膜 BN22156 即用型透析袋 扁平16 20KD CE膜 BN22157 即用型透析袋 扁平24 20KD CE膜 BN22158 即用型透析袋 扁平31 20KD CE膜 BN22159 即用型透析袋 扁平10 100KD CE膜 BN22160 即用型透析袋 扁平16 100KD CE膜 BN22161 即用型透析袋 扁平24 100KD CE膜 BN22162 即用型透析袋 扁平31 100KD CE膜 BN22163 即用型透析袋 扁平16 300KD CE膜 BN22164 即用型透析袋 扁平31 300KD CE膜 BN22165 即用型透析袋 扁平16 1000KD CE膜 BN22166 即用型透析袋 扁平31 1000KD CE膜 BN22167 即用型透析袋10-50000D CE膜 BN22168 即用型透析袋16-50000D CE膜 BN22169 即用型透析袋24-50000D CE膜 BN22170 即用型透析袋31-50000D CE膜 2干型透析袋 Mid-autumn Festival 普通干型透析袋,甘油涂层,使用前需预处理。 技术参数: 1、pH稳定范围:5-9 2、污染物水平:硫化物<0.3%;重金属<50ppm 3、温度抵抗性:可煮沸,可高压灭菌。 4、蛋白吸附:每克透析袋吸附蛋白量小于1ng。 5、化学兼容性:与很多盐兼容,比如CaCl2,(NH4)2SO4;还可与分子生物学及酶学中常用的水溶剂、有机溶剂兼容,如异丙醇、乙醇和丙酮。 预处理: 1、把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。 2、在大体积(500mL)的2%(W/V)的碳酸氢钠和1mmol/L EDTA (pH=8.0)中将透析袋煮沸10min。 3、用蒸馏水彻底清洗透析袋。 4、放在500mL的1 mmol/L EDTA (pH=8.0)中将之煮沸10min。 5、冷却后,置于20%的酒精中,放于4℃冰箱,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此时起取用透析袋必须戴手套。 6、在使用前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗干净。 百瑞极货号 BN22244 MD25-14干型透析袋 D16mm (14000D) BN22245 MD34-3.5干型透析袋 D22mm(3500D) BN22246 MD77-14干型透析袋 D49mm (14000D) BN22247 MD10-14干型透析袋 D6mm (14000D) BN22248 MD34-14干型透析袋 D22mm (14000D) BN22249 MD44-14干型透析袋 D28mm (14000D) BN22250 MD44-3.5干型透析袋 D28mm(3500D) BN22251 MD55-3.5干型透析袋 D35mm(3500D) 附不同类型生物透析袋的化学耐受性