适用于人血清、血浆或细胞培养上清液等样本  

简介  

     PD-1 是 Ｔ 细胞上的跨膜受体属于免疫球蛋白 B7-CD28 家族中的一员，相对分子质量为 55000，由胞外段、疏水性跨膜区及胞内段三者组成，编码基因为第 2 号染色体的 PDCD1 基因，胞内段的酪氨酸残基构成了 2 个基序，即免疫受体酪氨酸抑制基序及转换基序两部分。PD-1 的表达主要存 在于以下细胞的膜表面：(1)绝大部分机体免疫细胞；(2)多种癌细胞。

     现已证实，B7 家族中的 PD-L1(CD274)和 PD-L2(CD273)是 PD-1 的 2 个配体，二者具有 37%的同源序 列，但表达不同。虽然 PD-L2 与 PD-1 相互作用的亲和力强于 PD-L1，但 PD-L2 通常处于低表达状态且 表达范围局限，故目前认为 PD-1 的主要配体为 PD-L1。

     T 细胞通过双重信号的刺激发挥免疫效应，在信号传导过程中需要协同刺激分子的作用，而协同刺 激分子又分为正性和负性 2 种，正常生理状态下二者保持平衡。然而，在肿瘤患者中，肿瘤细胞会为自身打造出适合自身生长的肿瘤微环境，通过各种机制异常上调负性协同刺激分子，高表达 PD-L1，从而抑制 Ｔ 细 胞 的 活 化与增殖，并使 T 细胞杀伤肿瘤细胞的作用减弱，甚至丧失。基于 此，肿瘤可躲避机体的细胞免疫作用，发生免疫逃逸，进一步出现肿瘤的发生、发展。PD-1/PD-L1 信号 通路参与肿瘤免疫逃逸机制错综复杂，有研究发现，其可能还与诱导 T 细胞的凋亡、促进上皮细胞间质化等相关。 

检测原理  

本实验采用双抗体夹心 ELISA。用抗人 PD-L1/B7-H1 单克隆抗体预包被酶标板，加入适度稀释的样本和标 准品，其中的 PD-L1/B7-H1 会与其单抗结合，洗去游离成分；加入生物素化的抗人 PD-L1/B7-H1 抗体， 抗人 PD-L1/B7-H1 抗体与结合在单抗上的人 PD-L1/B7-H1 结合而形成免疫复合物，洗去游离的成分；加 入辣根过氧化物酶标记的亲合素，生物素与亲合素特异性结合，洗去未结合的酶结合物；加入显色剂， 若反应孔中有 PD-L1/B7-H1，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色；加终止液变黄。在 450nm 下测 OD 值，PD-L1/B7-H1 浓度与 OD450 值之间呈正比，可通过绘制标准曲线计算出标本中 PD-L1/B7-H1 浓度。