DualucifTM Firefly & Renilla Assay Kit（双荧光素酶报告 基因检测试剂盒）为检测基因的表达量提供有效的手段，在 DLR 检测中，萤火虫荧光素酶（Firefly luciferase）和海肾 荧光素酶（Renilla luciferase）的活性可在单个样品中依次检测。先以荧光素（Luciferin）为底物来检测萤火虫荧光素酶的活性，然后加入抑制萤火虫荧光素酶催化的物质，同时加 入腔肠素（Coelenterazine）检测海肾荧光素酶的活性，实现双荧光素酶报告基因检测。通过荧光素酶和其底物这一生物 发光体系，可以非常灵敏、高效地检测基因的表达。通常把感 兴 趣 基 因 的 转 录 调 控 元 件 或 5' 启 动 子 区 克 隆 在 Luciferase 的上游，或把 3'-UTR 区克隆在 Luciferase的下游， 构建成报告基因（Reporter gene）质粒，然后转染细胞，用适当药物等处理细胞后裂解细胞，通过检测荧光素酶活性的 高低来判断药物处理等对目的基因的转录调控作用。海肾荧光素酶更多地被用作检测转染效率的内参，以消除细胞数量 和转染效率的差异。 

       萤火虫荧光素酶是一种分子量约为 61 kD 的蛋白，在 ATP、镁离子和氧气存在的条件下，可以催化荧光素生成氧 化荧光素（Oxyluciferin），在荧光素被氧化的过程中，会产生光信号。海肾荧光素酶是一种分子量约为 36 kD 的蛋 白，在氧气存在的条件下，可以催化腔肠素氧化成肠酰胺 （Coelenteramide），在腔肠素氧化的过程中也会产生光信 号。本试剂盒的光信号可以通过化学发光仪、酶标仪或液闪 测定仪进行测定。该试剂盒具有检测迅速、灵敏度高、检测范围广，无细胞内源活性干扰等特点。

注意事项 

1. 为取得最佳测定效果，在用单管的化学发光仪测定时， 样品和测定试剂混合后到测定前的时间应尽量控制一致；使 用具有化学发光测定功能的多功能荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好，然后统一加入萤火虫荧光素酶检测试剂。

2. 由于温度对酶反应有影响，所以测定时，样品和试剂均 需达到室温后再进行测定。 

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。