英文名称：Reactive Oxygen Species Assay Kit

产品内容：

产品参数 Ex/Em: 504/529 nm 

贮存条件 -20℃避光保存，有效期见外包装。

产品介绍 

DCFH-DA (二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯) 本身无荧光，可自由透过活细胞膜进入细胞内，并被细胞内的酯酶水解，形成 DCFH，DCFH 无荧光且不能通透细胞膜，从而被细胞内的活性氧氧化生成有荧光的 DCF。根据活细胞中荧光的产生，可以判断细胞活性氧的含量和变化。用流式细胞仪或荧光显微镜可直接观察，是一种经典的组织或活细胞中活性氧检测方法。Rosup 为活性氧阳性诱导药物，根据其荧光信号强度，可分析活性氧的真正水平。

注意事项 

1. 阳性对照 Rosup 一般使用浓度为 100 μM （推荐浓度 100-400μM，具体依细胞类型而定）。通常刺激后 30 min-4 h 可以观察到显著的活性氧水平升高。对于不同的细胞，活性氧阳性对照的效果可能有较大的差别。如果在刺激后 30 min 内观察不到活性氧的升高，可延长诱导时间或适当提高活性氧阳性对照的浓度。如果活性氧升高得过快，可缩短诱导时间或适当降低活性氧阳性对照的浓度。 

2. 实验过程中，如果发现没有刺激的阴性对照细胞荧光也比较强，可以按照 1:2000-1:5000 稀 释 DCFH-DA ，使 DCFH-DA 的终浓度为 2-5 μM。探针装载的时间也可以根据 情况在 15-60 min 内适当进行调整。 

3. 活性氧阳性对照 (Rosup) 仅仅用于作为阳性对照的样品，并不是在每个样品中都需加入活性氧阳性对照。 

4. 探针装载后，一定要洗净残余的未进入细胞内的探针，否则会导致背景较高。