产品组成

保存条件 

     10~25℃保存 12 个月。

产品简介 

     本试剂盒采用高效结合核酸的离心柱配合独特的缓冲液系统，适合从 50~100 mg 普通植物中提取基 因组 DNA。试剂盒基于硅胶柱纯化技术，提取过程中无需使用有毒的酚氯仿，整个提取过程只需 30~40 min，可最大限度去除植物组织中的杂质，提取的基因组 DNA 片段完整、纯度高，可直接用 于下游 PCR 扩增、qPCR、分子标记以及文库构建等实验。

产品特点 

     ⚫ 操作简便：30~40 min 内完成数个样品的基因组 DNA 提取；

     ⚫ 安全低毒：无需酚、氯仿等有毒试剂； 

     ⚫ DNA 纯度高：提取的基因组 DNA 无杂质残留，适用于对纯度、完整性要求很高的下游实验。

适用范围 

     本产品适用于普通植物样品的基因组 DNA 提取。 

注意事项 

     1. 第一次使用前应在 Buffer GP3 和 Buffer GW2 中加入无水乙醇，加入量请参考瓶上标签； 

     2. 植物组织样品应避免反复冻融，否则会导致提取的基因组 DNA 片段小且得率低； 

     3. 使用前请检查 Buffer GP1 和 Buffer GP2 是否出现结晶或者沉淀，如有沉淀，请置于 37℃水浴 溶解摇匀后使用； 

     4. 本试剂盒所有离心操作均在室温下进行。

使用方法

     1. 取植物新鲜组织 50~100 mg 或干重组织 20 mg，加入液氮充分研磨。加入 400 μL Buffer GP1 和 6 μL RNase A(10 mg/mL)，涡旋振荡 1 min，室温放置 10 min，使其充分裂解； 

     2. 加入 130 μL Buffer GP2，充分混匀，涡旋振荡 1 min；

     3. 12,000 rpm（~13,400×g）离心 5 min，将上清移至新的离心管中； 

     4. 加入 1.5 倍体积的 Buffer GP3（使用前检查是否已加入无水乙醇）（例如 500 μL 上清液加入 750 μL Buffer GP3），立即振荡 15 s 充分混匀，此时可能出现絮状沉淀但不影响后续实验； 

     5. 将上步所得溶液和沉淀分两次加入到吸附柱DNA Columns 中（吸附柱放入收集管中），12,000  rpm（~13,400×g）离心 30 s，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中； 

     6. 向吸附柱中加入 600 μL Buffer GW2（使用前检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm（~13,400 ×g）离心 30 s，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中；

     注意：如吸附膜呈现绿色，向吸附柱中加入 500 μL 无水乙醇，12,000 rpm（~13,400×g）离心 30 s， 弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。

     7. 重复步骤 6； 

     8. 12,000 rpm（~13,400×g）离心 2 min，弃废液。将吸附柱开盖置于室温数分钟，以彻底晾干吸 附材料中残余的漂洗液；

     注意：此步骤目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留可能会影响后续的酶反应实验（酶 切、PCR 等）。 

     9. 将吸附柱放到一个干净离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加 50~200 μL Buffer TE 或 ddH2O， 室温放置 2~5 min，12,000 rpm（~13,400×g）离心 2 min，收集 DNA 溶液，如果要增加基 因组 DNA 的得率，可以将离心得到的溶液重新加至吸附膜上，重复洗脱。将洗脱的 DNA 溶液 置于-20℃保存。

     注意：如果下游实验对 pH 值或 EDTA 敏感，建议用 ddH2O 洗脱，若用 ddH2O 洗脱应保证其 pH 值在 7.0~8.5（可以用 NaOH 将水的 pH 值调到此范围）；若需长期保存，推荐使用 Buffer TE 洗脱后置于- 20℃保存。

常见问题与解决办法 

Q1：柱子出现堵塞？

A1：

     1) 样品用量过多。建议按照说明书推荐量进行提取； 

     2) 样品富含多糖多酚类物质。处理富含多糖多酚的组织，推荐用专用试剂盒； 

     3) 离心温度过低。本产品使用操作均在室温下进行。 

Q2：DNA 提取得率低？ 

A2：

     1) 样品用量过少。建议按照说明书推荐量进行提取；

     2) 样品材料质量不好。尽量选用新鲜组织样品，样品采集后应液氮速冻，然后置于-80℃保存，建议 尽快提取，避免反复冻融； 

     3) 样品裂解不充分。若样品过量则适当减少样品量，加入 Buffer GP1 后需涡旋振荡 1min 使其充 分混匀，可适当延长裂解时间。 

Q3：提取的 DNA 中有 RNA 污染？ 

A3：

     1) 未加入 RNase A 消化。请按照说明书要求加入 RNase A 消化； 

     2) 样品中 RNA 含量过多。可适当增加 RNase A 用量或延长消化时间。

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